PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN METODE CYANMETH

PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN METODE CYANMETH

—        Pemeriksaan kadar hemoglobin cara Photoelektrik kolorimetri(Hb Cyanmeth) merupakan pemeriksaan yang lebih teliti dibandingkan dengan cara Visual( Hb Sahli). Tingkat faktor kesalahan hanya berkisar kira-kira 2%.

Prinsip pemeriksaan → Derivat hemoglobin dalam darah  kecuali verdoglobin akan diubah secara kuantitatif menjadi hemoglobincyanide(Cyanmethemoglobin) dengan menggunakan larutan pereaksi, di mana reagen yang sudah siap pakai dalam kit. Maka proses reaksi yang sempurna hanya terjadi dalam waktu 3 menit, warna yang terbentuk sangat stabil dan dapat diukur dengan fotometer.

—        Macam – macam derivat Hb dalam darah :

1. Methemoglobin
2. Karboxyhemoglobin
3. Sulfhemoglobin.

Komposisi reagen drabkin :

         - Natriumbicarbonat         : 1 gr.

         - Kaliumsianida                : 50 mg.

         - Kaliumferrisianida         : 200 mg.

         - Aquadest Add                : 100 ml.

         - Adakalanya ditambahkan sedikit non ionic detergent : 0,5-1 ml.

Meskipun larutan drabkin berisi sianida, tetapi ia tidak dianggap beracun dalam pengertian sehari-hari karena jumlahnya sedikit.

Larutan ini berwarna kuning jernih, PH 7,0 – 7,4.

Penyimpanan larutan ini dalam botol coklat.

Cek sebelum dipakai ! ( Warna, kejernihan, PH )

—        Cara kerja pemeriksaan :

1. Sediakan 2 tabung reaksi. Masing-masing diisi :

 

Inkubasi  selama 3 menit.
2. Operasional fotometer 4010:

      - Hidupkan fotometer ( inkubasi ± 15 menit).

      - Hidupkan pump/ alat penghisap.

      - Atur : Panjang gelombang : 546 nm.

                   Program                   : C/F.

                   Faktor                      : 36,8.

      - Bilas kuvet dan keringkan.

      - Masukkan Blanko, tekan Zero.

      - Keringkan kuvet.

      - Masukkan sampel, tekan Result.

      - Baca hasilnya.

Fotometer

—        Harga Normal hemoglobin Cyanmeth :

    - Wanita                      : 12 – 16 g/dl.

    - Pria                     : 14 – 18 g/dl.

    - Bayi baru lahir                 : 16 – 25 g/dl.

    - Infants                      : 10 – 15 g/dl.

    - Young children                : 11 – 14 g/dl.

    - Anak-anak                         : 12 – 16 g/dl.

Faktor yang mengganggu dalam pembacaan fotokolorimetri:

 Kekeruhan berat yang dapat disebabkan oleh leukositosis, lipemia, dan adanya globulin abnormal(macroglobulinemia).

Hb Cuprisulfat

Tujuan → Melakukan pemeriksaan Hb pada Donor sebelum dilakukan penyadapan darah.

Prinsip → Pemeriksaan Hb dengan Cuprisulfat adalah mengukur kadar Hb berdasarkan perbedaan berat jenis darah dengan berat jenis suatu larutan Cupfer sulfat.

—        Alat dan Bahan.

—        Tabung  silinder tembus pandang(diameter 2,5 cm; panjang 10 cm) atau beaker glass 50 ml.

—        Mikrokapiler/ pipet kapiler.

—        Blood lancet.

—        Kapas.

—        Alkohol 70%.

—        Larutan Cupri Sulfat Bj 1.053

A. Prosedur kerja.

1.Siapkan 1 tabung silinder tembus pandang dengan diameter 2,5 cm dan tinggi 10 cm( atau menggunakan beaker glass 50 ml). Masing-masing diisi dengan larutan Cupfer Sulfat Bj 1.053 dengan volume 50 ml.

2.Siapkan mikrokapiler/pipet kapiler yang baik ,bersih dan kering.

3.Siapkan perlengkapan lainnya : blood lancet, kapas, alkohol 70% untuk membuat luka perifer.

*Pemeriksaan Hb dengan Cuprisulfat.

—        Cara ini hanya dipakai untuk menetapkan kadar Hb dari donor yang diperlukan untuk transfusi darah. Tidak bisa untuk mendapatkan kadar Hb dengan tepat dan tetap, hanya kesan-kesan saja. Satuan yang digunakan adalah dalam %. Kadar Hb dari seorang donor cukup kira-kira 80%. Pemeriksaan Hb Cuprisulfat masih digunakan di PMI untuk mengetahui kadar Hb secara cepat.

*Pembuatan larutan Hb Cupfersulfat Bj1.053 :

—        Buat larutan pokok Cupfersulfat Bj 1.100.

—        Timbang Cupfersulfat(CuSO4.5 H₂O) sebanyak 159 gram.

—        Larutkan dalam 1 lt aquadest (dalam labu takar 1lt ), saring dengan kertas saring kemudian tepatkan isinya sampai 1 lt.

—        Dari larutan pokok CupferSulfat Bj 1.100 buat larutan Cupfersulfat Bj 1.053.

—        Ukur sebanyak 520 ml larutan Cupfersulfat Bj 1.100. Kemudian ditambah dengan aquadest sampai 1 lt ( 480 ml aquadest ). Pakai labu takar ukuran 1 lt, campur baik-baik.